基因工程中的转化方法

1. 转化现象指的是细菌等细胞通过吸收外源DNA，从而改变自身的基因型和表现型。

2. 化学法转化，如使用氯化钙，是通过创造适宜的条件（如细胞处于低渗溶液中），使细胞易于吸收外源DNA。

3. 氯化钙法转化细菌的具体步骤包括：将细菌暴露在0℃以及含有CaCl2的低渗溶液中，使细胞膨胀；然后将DNA与钙磷酸复合物结合，并通过热击处理促进DNA的吸收。

4. “鸟枪法”或“散弹射击法”是直接分离基因的一种方法。它涉及使用限制酶切割供体DNA，然后通过载体将其片段转入受体细胞中进行复制和扩增，最终筛选出含有目的基因的细胞。

5. 尽管“鸟枪法”操作繁琐且具有盲目性，但20世纪80年代后，DNA测序技术和PCR技术的出现简化了基因工程操作。DNA序列分析技术的进步使得对提取基因的核苷酸序列分析成为可能，而PCR技术则能在短时间内大量扩增目的基因片段。