革兰氏染色法操作流程

革兰氏染色法是用于鉴别细菌种类的重要方法，其主要步骤包括初染、媒染、脱色、复染四个部分。具体操作流程如下：

首先，进行载玻片固定。在无菌操作条件下，用接种环取适量细菌均匀涂于干净载玻片上，然后在火焰上加热以杀死细菌并使其牢固粘附。

接着，进行草酸铵结晶紫染色，需持续1分钟。随后，用自来水冲洗掉浮色。

然后，使用碘-碘化钾溶液进行媒染，持续时间为1分钟。之后，倾掉多余溶液。

接下来，用中性脱色剂，如95%乙醇或丙酮酸进行脱色，持续30秒。革兰氏阳性菌不被褪色，仍然呈紫色，而革兰氏阴性菌则被褪色，呈现无色。

最后，使用蕃红染液或沙黄进行复染，持续时间为30秒。革兰氏阳性菌仍保持紫色，而革兰氏阴性菌则变成红色。这样一来，两种细菌就被区分开来了。

此法口诀为：“1-1-半-半”，形象地概括了革兰氏染色法的操作流程。通过这一方法，我们能有效地区分革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌，为后续的细菌学研究和临床诊断提供重要依据。