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凝胶柱层析操作方法?
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凝胶柱层析的使用方法大体有一下步骤:
(1)预处理称取葡聚糖凝胶(有不同型号)若干克,加入洗脱剂(通常为甲醇或者水,这里以甲醇为例)约20倍凝胶量,置室温下3h进行溶胀,溶胀必须彻底,否则会使上柱后流速变慢,凝胶断裂等。
(2)装柱凝胶层析柱的直径与柱长之比一般为1:15
(3)加样装好的色谱柱至少要用相当于3倍保留体积的洗脱剂平衡。
(4)洗脱与收集洗脱时,用甲醇作洗脱剂,并且要连续不断地进行,使凝胶柱上端保持一定的液层,防止凝胶柱表面的液体流干。
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