固定化酶制备方法

固定化酶的制备方法主要分为物理法和化学法两大类，其中物理法包括物理吸附法和包埋法。物理吸附法是利用吸附剂如活性炭、氧化铝等将酶吸附在其表面，操作简便，条件温和，不会损伤酶活性，且载体经济易得，可重复使用。共价结合法（如中国采用的“对位-β-硫酸酯乙砜基苯胺”）是通过化学键将酶与载体固定，这种方法主要用于非必需基团的连接，如氨基、羧基等，不干扰酶的活性。

化学法中，交联法是通过双功能团试剂如戊二醛使酶分子间形成交联，形成不溶于水的固定化酶网络。包埋法则将酶包在凝胶网格或半透膜中，分为格子型和微胶囊型，适用于水溶性和细胞的固定化，如包埋青霉素酰化酶的菌体，可实现连续生产6-氨基青霉烷酸。

固定化后的酶在稳定性上有显著提升，能更好地耐受温度和pH变化。固定化酶的底物专一性保持不变，但在实际应用中的效率显著提高，如5′-磷酸二酯酶在工业中能提高几十倍甚至几百倍的效率。